流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法） 25T
產品簡介
通過對樣本中禽流感病毒H7基因和N9基因的特異性RNA核酸片段分別進行定性檢測，可用于臨床對可疑感染患者的病原學鑒別診斷。流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）
產品詳細信息
禽流感病毒H7N9（2013）核酸測定試劑盒（熒光PCR法）
Avian influenza virus （H7N9） Real Time RT-PCR Kit
【產品名稱】
通用名稱：禽流感病毒H7N9（2013）核酸測定試劑盒（熒光PCR法）
英文名稱：Avian influenza virus （H7N9） Real Time RT-PCR Kit
【包裝規格】 25人份／盒
【預期用途】通過對樣本中禽流感病毒H7基因和N9基因的特異性RNA核酸片段分別進行定性檢測，可用于臨床對可疑感染患者的病原學鑒別診斷。
【檢驗原理】本試劑盒采用聚合酶鏈式反應（PCR）技術結合熒光探針技術，對禽流感H7N9特異性核酸片段進行熒光PCR檢測。
【試劑盒主要組成成份】
|
序號
|
組分
|
數量
|
體積／人份
|
||
|
1
|
H7N9核酸熒光PCR檢測混合液
|
480ul×1
|
19ul
|
||
|
2
|
RT-PCR酶
|
28ul×1
|
1ul
|
||
|
3
|
DEPC-H2O
|
400ul×1
|
|||
|
4
|
陽性對照品
|
30ul×1
|
|||
說明：不同批號的組分不可以互換使用。
自備試劑：Trizol；氯仿；75%乙醇；異丙醇或磁珠法RNA提取試劑；本公司可以代為訂購或提供銷售商聯系方式。
【儲存條件和有效期】 試劑盒應在－20℃及以下溫度避光保存，有效期12個月。采用冰盒行運輸；熒光PCR檢測混合液反復凍融不宜超過3次。
【適用儀器】 本試劑盒適用于ABI7000，ABI7300，ABI7500，ABI7900，MJ-chromo4，MX3000P，MX3005P，SmartCyclerⅡ，Rotor-Gene6000，Lightcycler R480，iCycleriQ4，iCycleriQ5，Bio-Rad CFX96，SLAN等多色熒光PCR儀及相應軟件。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml**生理鹽水），用無菌棉球將試管塞緊后，密閉送檢。標本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。【檢驗方法】
1.流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100?l氯仿， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應管數）,振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環參數設置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環45次;單點熒光檢測在60℃，反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。
備注：如使用ABI系列PCR儀，請務必于passive reference 和 quencher處均選擇“none”。
5.流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法） 閾值設定
閾值設定原則以閾值線剛好超過DEPC-H2O的*高點。
6. 流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）質量控制：試劑盒各對照品須達到以下要求，否則實驗視為無效。
|
Ct值
|
|||
|
FAM通道（檢測H7）
|
HEX/VIC/JOE（檢測N9）
|
||
|
DEPC-H2O
|
UNDET或45
|
UNDET或45
|
|
|
陽性對照品
|
≤35
|
≤35
|
|
7. 流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）試驗結果的判斷
|
通道
|
Ct值
|
結果判斷
|
|
|
1
|
FAM+HEX
|
UNDET或45
|
樣本低于檢測限，報告為陰性
|
|
2
|
FAM+HEX
|
≤43
|
FAM通道為H7基因陽性；
HEX/VIC/JOE通道為N9基因陽性
|
|
3
|
FAM+HEX
|
43～45
|
復檢一次,如仍為43～45,則報告為陰性
|
進行定量檢測時，儀器生成標準曲線后，自動顯示待檢樣品定量值。
【參考值范圍】陰性（檢測對象H7N9為病原微生物，在健康人體中不存在）。
【對檢驗結果的解釋】實驗室環境污染，試劑污染，樣品交叉污染會出現假陽性結果；試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果。
【檢驗方法的局限性】當檢測樣本中被檢核酸濃度含量低于*低檢測限5×103copies/ml時可能會發生假陰性的結果。
【產品性能指標】*低檢測限：1×103copies/ml；
【注意事項】 開始檢測前請仔細閱讀本說明書全文。
1. 整個檢測過程應嚴格分在三區進行：PCR反應體系的配制區；標本處理、加樣區；PCR擴增、熒光檢測及結果分析區。各區使用的儀器、設備、耗材和工作服應獨立專用。實驗后即請清潔工作臺，并進行**。
2. 使用不含熒光物質的一次性手套（經常替換） 、一次性專用離心管、自卸式移液器和帶濾嘴吸頭。
3. 試劑準備和標本處理應使用超凈工作臺（負壓式）或防污染罩，以防止對環境污染。
4. 每次實驗應設置陰、陽性對照品。
5. 操作人員應經過專業培訓，具有一定經驗和操作技能。
6. 操作臺、移液器、離心機、PCR擴增儀等儀器設備應經常用10%次氯酸或75%酒精、紫外線燈或臭氧**處理。
7. 實驗中接觸過標準品和對照品的廢棄物品（如吸頭）、擴增完畢的離心管、標本等應進行無害化處理后方可丟棄。
8. 試劑使用前應在常溫下充分融化并混勻。
9. PCR反應混合液應避光保存。
10. 反應管中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊。
11. 不同批號的試劑請勿混用，請在有效期內使用試劑盒。
流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）
流感病毒H7N9核酸試劑盒（熒光PCR法）
關于我們|
易展動態 |
易展榮譽 |
易展服務 |
易家文化 |
英才集結號 |
社會責任 |
聯系我們
備案號：粵ICP備11010883號|
公安機關備案號：44040202000676|
版權問題及信息刪除： 0756-2183610
QQ：
Copyright?2004-2017 珠海市金信橋網絡科技有限公司 版權所有
